Химия

 


 

Производство

Сырье и энергия
Сера и серная кислота
Связанный азот
Удобрения и химикаты
Силикаты
Кислоты щелочи хлор
Металлы
Алюминий
Чугун и сталь
Полупроводники
Топливо
Органический синтез
Синтетические соединения
История химии



Яндекс.Метрика

Структура m-PHK

Структура m-PHK в проблеме расшифровки строения нуклеиновых кислот представляла собой частный случай. Самой важной и принципиальной была расшифровка последовательностей ДНК — молекул, из которых построены гены. Собственно, на основании строения m-PHK можно было сделать заключение и о строении одного гена, а именно гена, на котором синтезируется m-PHK. Это позволило перейти к попыткам синтеза генов. Но об этом будет рассказано далее, а здесь необходимо остановиться на работах по расшифровке строения индивидуальных ДНК. Перспективы этого некоторым ученым казались невероятными. Еще в 1968" г. Э. Чаргафф писал,
что детальное определение последовательностей нуклеотидов в молекуле ДНК находится вне возможностей современной науки. Он утверждал что прочитать полную нуклеотидную последовательность ДНК удастся лишь в XXI в. Однако уже в середине 70-х годов задача была в основном решена. При этом принцип расшифровки предложенный в лабораториях Ф.Сенгера (Англия) и У.Гилберта (США), оказался даже более простым и доступным, чем метод расшифровки строения белков.
Исключительную роль в этом сыграли работы Ф. Сенгера, который в 60-х годах с расшифровки строения белков переключился на расшифровку строения нуклеиновых кислот. Он предложил в 1965 г. метить нуклеиновые кислоты изотопами 32Р, что позволило работать с чрезвычайно малыми массами анализируемого материала (менее 10~6 г). Затем им был разработан ряд методов определения положения нуклеотидов в цепи нуклеиновой кислоты. Определение идет с помощью синтеза комплементарных ДНК на однонитчатой ДНК как на матрице. Именно эта матрица и является тем поли нуклеотидом, последовательность которого необходимо установить. По методу Сенгера в четырех параллельных пробах синтезируются все возможные фрагменты поли нуклеотида с остановкой реакции на заданном основании (А, Т, Г или Ц в четырех параллельных пробах). Затем с помощью электрофореза на полиакриламидном геле получают «карту» всех таких фрагментов, длина которых дает точное положение определяемого основания вдоль цепи.
С помощью метода расшифровки в 1967 г. была выявлена первичная структура 5S РНК (120 оснований). В 1976 г. В. Фирс с сотрудниками (Бельгия) установил полную химическую структуру первого живого организма — бактериофага MS2, для которого стала таким образом известна химическая формула. Этот бактериофаг представлял собой нить РНК из 3569 нуклеотидов. Кроме того, в- состав его входили 180 одинаковых белковых молекул и так называемый А-белок — всего одна молекула, которая определяла форму оболочки организма.
В 1977 г. Ф. Сенгер выяснил структуру фага, состоящего из ДНК (Ф XI74) и включающего 5375 оснований. Затем он перешел к расшифровке генов — генома митохондрий человека и быка, включающих приблизительно 16 500 оснований. В начале 70-х годов У. Гилбертом и М. Максэмом (США) был разработан и другой метод определения последовательности нуклеотидов. В нем использовали тот же принцип — определение положения оснований вдоль цепи ДНК. Однако вместо синтеза исследуемую нить просто расщепляли по одному из оснований, предварительно пометив конец нити радиоактивным фосфором згр. в разработке этого метода принимали участие советские ученые. В 1973 г. Е.Д.Свердлов с сотрудниками предложил идею совместного определения аденина и гуанина. В 1976 г. она была осуществлена совместно У. Гилбертом, М. Максэмом и А. Д. Мирзабековым. За эти работы Ф. Сенгер и У. Гилберт были отмечены Нобелевской премией.


1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200


Интересное



 

© 2011 Химическая промышленность
Копирование материалов сайта разрешается только с указанием прямой индексируемой ссылки на источник.